Métodos De Trabalho Em Bioquímica Vegetal E Tecnologia De Enzimas - Os trabalhos de laboratório, muitas vezes solitário ou em equipe, requerem planejamento e disciplina visando análises precisas e confiáveis. Para análises bioquímicas em tecidos vegetais, por exemplo, faz-se necessário uma gama de procedimentos que vão desde a coleta e processamento, até a melhor maneira de armazenar os extratos e por fim a análise da atividade enzimática ou teor de compostos e macromoléculas de interesse biológico.

Este livro foi proposto como desafio para os alunos da disciplina Tecnologia de Enzimas (FCA/UNESP- Campus de Botucatu), como parte de suas atividades acadêmicas. Desafio aceito, o texto foi organizado em capítulos, os quais descrevem diferentes temas e suas metodologias utilizadas em aulas práticas. Esperamos que o texto possa servir de apoio àqueles que necessitem iniciar ou dar continuidade a trabalhos que envolvam análises bioquímicas em tecidos vegetais.
O estudo de enzimas é fundamental em bioquímica e fisiologia vegetal, visto que praticamente, todas as respostas da planta envolvem processos metabólicos, os quais são regulados por diversos complexos enzimáticos. Dada a sua importância, a natureza da estrutura das enzimas e a forma do sítio ativo podem ser afetadas por quaisquer agentes capazes de provocar mudanças conformacionais na estrutura protéica. Isso torna a atividade enzimática dependente do meio ambiente, notadamente do pH e da temperatura.
A maioria das enzimas apresenta um valor de pH para a qual sua atividade é máxima, e a velocidade da reação diminui à medida que o valor do pH se afasta desse valor ótimo, que é característico para cada enzima, mas com frequência, está próximo do pH neutro. A influência do pH sobre a catálise enzimática só pode ser compreendida à partir da análise dos grupos dissociáveis presentes nos grupos radicais dos aminoácidos.
Assim, para realizar análises enzimáticas de qualquer natureza, i.e. tecidos vegetais, animais ou de microrganismos, normalmente utiliza-se vários reagentes e, dentre esses, o uso de uma solução tampão é um recurso altamente necessário. Um tampão é uma mistura de substâncias químicas que torna possível o extrato enzimático resistir a variações de pH, porém, cada tampão tolera uma variação de pH dentro de uma faixa particular.

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